Sviluppo di una terapia a RNA per la retinite pigmentosa

L'obiettivo principale di questo progetto è sviluppare una nuova classe di RNA terapeutici, gli RNA non codificanti SINEUP, come cura innovativa per retinite pigmentosa 11 (RP11). Le SINEUP sono una nuova classe funzionale di long noncoding RNA (lncRNA) antisenso naturali in grado di aumentare in modo specifico i livelli di proteine bersaglio promuovendo la traduzione di mRNA target. L'attività delle SINEUP dipende dalla combinazione di due domini: la regione antisenso sovrapposta, o Binding Domain (BD), detta la specificità delle SINEUP, mentre un elemento SINEB2 agisce come Effector Domain (ED) e UP regola la traduzione dell'mRNA target. La loro struttura modulare può essere utilizzata per ingegnerizzare artificialmente il loro BD e progettare SINEUP sintetiche per aumentare in modo specifico la traduzione di qualsiasi gene di interesse. La retinite pigmentosa 11 (RP11) è una distrofia retinica ereditaria autosomica dominante causata da mutazioni nel gene PRPF31 che codifica un componente essenziale dello spliceosoma. La maggior parte delle mutazioni sono loss-offunction e determinano l'aploinsufficienza di PRPF31. Ad oggi, non sono disponibili cure. Il razionale di questo progetto è che SINEUP può rappresentare una terapia innovativa in quanto ripristina i livelli fisiologici di PRPF31 mentre la sovraespressione di questa proteina potrebbe portare a disregolazioni patologiche. Verificheremo la nostra ipotesi perseguendo obiettivi specifici: cellule umane dell'epitelio pigmentato retinico (RPE) e gli organoidi retinici derivati da iPSCs di pazienti affetti da RP11 o portatori sani della malattia e controlli saranno trasdotti con vettori AAV2 o lentivirali che esprimono SINEUP per PRPF31. Prevediamo di dimostrare l'efficacia di una nuova terapia a RNA per una malattia genetica della retina e di avere una prova di concetto per una nuova piattaforma terapeutica applicabile anche ad altre patologie.